维生素D分型及血清浓度测定

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维生素D（VitaminD,VD）为固醇类衍生物，促进肠道钙磷吸收，对肌肉骨骼健康至关重要[1]，具抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素。目前认为维生素D也是一种类固醇激素，维生素D主要包括维生素D2（麦角钙化醇）和维生素D3（胆钙化醇），常用于防治骨质疏松症、肾原性骨病（肾病性佝偻病）、甲状旁腺功能亢进（伴有骨病者）、甲状旁腺功能减退、营养和吸收障碍引起的佝偻病和骨软化症、假性缺钙（D-依赖型Ⅰ）的佝偻病和骨软化症。

维生素D缺乏不仅与骨质疏松症和骨软化症相关，而且容易导致肌肉力量下降，近年来还发现维生素D与癌症、心血管疾病、糖尿病等都有相关性，体内足量的维生素D水平对癌症、多发性硬化症、糖尿病等有一定预防作用[2]。国外研究表明，在安全范围内维生素D摄取量的增加可能降低癌症的发病风险，血清低水平维生素D与较高的外周动脉疾病发病率呈正相关[3]。

维生素D2、D3作为维生素D家族中最重要的成员，维生素D2主要来源于植物性食物，维生素D3由皮肤中7-脱氢胆固醇通过阳光中的紫外线照射裂解转化及摄取的动物性食物。其中维生素D2在人体内的半衰期较短且代谢产物结合蛋白量远比维生素D3少，生理活性较D3弱。

这两种形式的维生素D无生物活性，需与血液中的维生素D结合蛋白(VDBP)结合后，形成人体内源性的25-羟基维生素D，反映维生素D营养状态。作为维生素D在体内的主要储存形式，血清中的25羟维生素D3浓度可以作为人体维生素D含量的最佳指标，而服用维生素D2补充剂的患者则需检测25羟维生素D2。

目前，检验医学中心测定维生素D的方法为ELISA法和化学发光法，其原理均为抗原抗体结合反应。

ELISA法用于半定量检测25羟维生素D3，化学发光法用于定量检测总维生素D（25羟维生素D3和25羟维生素D2）。

1.ELISA法

项目申请单开具：选择申请单→检验科（可用）→免疫→申请单信息定位输入代码eswqwssd[25羟维生素D测定（ELISA法)）]。

检测方法：ELISA法

标本要求：静脉血（黄管）2-3ml

参考范围：

10ng/ml缺乏

10-29ng/ml不足

30-ng/ml足够

ng/ml潜在毒性

报告时间：一周

2.化学发光法

项目申请单开具：选择申请单→检验科（可用）→免疫→申请单信息定位输入代码ewqwssdc[25羟维生素D测定（化学发光法）]。

检测方法：化学发光法

标本要求：静脉血（黄管）2-3ml

参考范围：

10ng/ml缺乏

10-29ng/ml不足

30-ng/ml足够

ng/ml潜在毒性

报告时间：一天

ELISA法和化学发光法基于免疫反应原理，存在交叉反应不完全的方法学局限，当临床需明确患者服用25-羟基维生素Ｄ2补充剂时，ELISA法和化学发光法不足以精确地反映维生素D的分型与浓度。

检验医学中心应我院儿童医学中心要求开展维生素D分型及血清浓度测定检测，采用液-质联用分析技术精确地定量检测体内维生素D，同时测定血清中维生素D2和维生素D3的含量[5]，为临床合理补充维生素Ｄ及临床相关疾病的诊断提供参考。

3.液-质联用分析

项目申请单开具：选择申请单→检验科（可用）→外送→申请单信息定位输入代码qwssdcd（W25羟维生素D测定）。

检测方法：LC-MS/MS（液相二级质谱）

标本要求：静脉血（黄管）2-3ml

参考范围：20-ng/ml

报告时间：一周

参考文献

[1]HolickMF,BinkleyNC,Bischoff-FerrariHA,etal．Evaluation,Treatment,andPreventionofVitaminDDeficiency:anEndocrineSocietyClinicalPracticeGuideline[J].JournalofClinicalEndocrinologyMetabolism,,96(7):-．

[2]ChakrabortiCK.VitaminDasapromisinganticanceragent[J].IndianJPharmacol,.43(2)：-.

[3]ChuaG,ChanY.VitaminDstatusandperipheralarterialdisease:evidencesofar[J].VascHealthRiskManag,,7:-.

[4]周建烈，杨宗麟．维生素D补充与药物选择[J].上海医药，,32(10):-．

[5]禹松林，方惠玲，程歆琦，等.五种自动化免疫学方法和液相色谱串联质谱方法测定25羟维生素D的比较[J]中华检验医学，,7.

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